Sim! Através da tela de alteração de Vendedores dos Itens da Ordem de Serviço. Esta tela pode ser acessada clicando no ícone "..." de cada item, veja:

Agora, na tela que se abre, você pode informar o Vendedor 2, veja:

Por fim, quando algum item da Ordem de Serviço possuir um Vendedor 2 informado, na Grade de Itens, será exibida a coluna [Vendedor 2], veja:

Validações e Permissões

É importante ressaltar que a possibilidade de informar vendedor 2 dá-se de acordo com o parâmetro por empresa [76 - Utiliza múltiplos vendedores por item na venda?]. Assim como, no Grupo dos Itens, são levados em consideração os campos [Permite vendas com múltiplos vendedores?] e [Exige múltiplos vendedores na venda?] para determinar se pode informar Vendedor 2 em determinado item e se será ou não obrigatório informar Vendedor 2..
É tambem considerado o direito de alterar vendedor. Caso o direito Alterar Vendedor estiver marcado na R697 para a R11, o usuário então passa a ter permissão para alterar o vendedor do item. O mesmo serve para o vendedor 2.

Obs: O.S's já fechadas na R11 não poderão ser alteradas, mesmo se o direito estiver ativo.